Cómo Reproducir Trichoderma [Métodos Caseros y De Laboratorio]

El Uso De Microorganismos Benéficos En La Agricultura.

En la agricultura convencional moderna, los fungicidas son la principal herramienta empleada para el control de hongos fitopatógenos. Es el uso continuado de estos productos químicos para el control de estos microorganismos ha provocado a través del tiempo el desarrollo de resistencia a los fungicidas utilizados.

Por ello, la tendencia actual ha sido racionalizar el uso de fungicidas y desarrollar nuevas alternativas de control a través del uso de agentes de control biológico.

Por otra parte, se ha desarrollado a nivel europeo y norteamericano un importante mercado que demanda productos hortofrutícolas obtenidos en procesos limpios de producción, generados en sistemas agrícolas que no utilizan pesticidas sintéticos durante el proceso productivo.

En este marco, en la actualidad, se han desarrollado biopreparados en base a microorganismos antagonistas como Trichoderma spp, que pueden reducir el impacto de los patógenos vegetales.

Este hongo antagonista permite el control de patologías fungosas en árboles frutales, forestales y hortalizas, es posible aislarlo localmente y reproducirlo en forma masiva para su aplicación a nivel de campo.

El objetivo es colaborar en la obtención y aplicación correcta del hongo antagonista Trichodema spp.

Características Del Género Trichoderma.

El hongo Trichoderma es un hongo imperfecto perteneciente a la Subdivisión: Deuteromycotina; clase: Deuteromycetes (Aleusopolus 1979).

El género Trichoderma se encuentra ampliamente distribuido en todo el mundo, encontrándose en prácticamente todos los suelos y otros hábitat naturales, especialmente en aquellos que contienen materia orgánica.

Mecanismos De Acción Del Hongo.

Trichoderma como antagonista, puede tener diferentes mecanismos de acción entre los que se encuentran el micoparasitismo, competencia, antibiosis e inducción de resistencia en las plantas.

Micoparasitismo.

Este proceso de micoparasitismo sería uno de los principales mecanismos involucrados en el antagonismo de Trichoderma como agente biocontrolador.

Este proceso incluirá el crecimiento del antagonista hacia el patógeno, desarrollándose alrededor de éste o formando estructuras similares a ganchos o apresorios en la superficie del hospedero, que le permitirían, penetrar al interior (del patógeno) y por acción de enzimas líticas (quitinasa y B-1-3-glucanasa) degradar su pared celular (Elad et al, 1993, Garza et al., 1997; Metcalf y Wilson 2001; Brunner et al 2003).

Competencia.

La competencia por sustrato y nutrientes sería otro mecanismo que explicaría el efecto antagónico de Trichoderma.

Este proceso ocurre cuando dos o más organismos requieren el mismo recurso y el uso de éste por uno, reduce la cantidad disponible para el otro.

La competencia fundamentalmente se produce por recursos esenciales como carbono, nitrógeno, hierro y espacio físico.

Un mecanismo que recientemente ha ganado adherentes es la competencia que se produce a nivel de la rizosfera cuando se aplican cepas de Trichoderma a las semillas, produciéndose un rápido crecimiento en conjunto con el desarrollo radicular de las plantas tratadas, compitiendo entonces a este nivel por nutrientes y espacio. (Howell et al 2000; Harman 2000).

Antibiosis.

La actividad antibiótica de Trichoderma se debería a la secreción de sustancia antibióticas o metabolitos que inhiben la actividad parasítica de los patógenos (Dubos, 1987).

Estos metabolitos serían volátiles y no volátiles, del tipo antibióticos como viridín, trichodermin, glioviridin, gliotoxin y harzaniolide (Lumsden et al 1992).

De todas estas micotoxinas la más representativa es Trichodermin que actuaría inhibiendo la actividad ribosomal de los patógenos, por lo tanto, su reproducción (Ghisalberti, 1991).

Inducción de resistencia en las plantas.

Otro mecanismo propuesto para explicar la actividad biocontroladora de especies de Trichoderma, es la inducción de resistencia en las plantas hospederas tratadas con el agente biocontrolador.

Este concepto ha sido fundamentado por Yedidia et al 1999 y Yedidia et al 2000, quien demostró que raícen de cucurbitáceas inoculadas con T. harzianum, presentan una respuesta defensiva tanto en las raíces como en las hojas de las plantas tratadas, demostraron que las hifas del hongo biocontrolador penetran la epidermis y corteza superior de la raíz de la cucurbitácea.

Captura Del Hongo Trichoderma.

Para reproducir el Trichoderma, primero lo tendremos que capturar de su hábitat natural.

Es fundamental elegir sitios nativos o ecosistemas que no estén contaminados por agentes químicos. Como, por ejemplo:

• Bosques nativos o zonas boscosas alejadas de la intervención humana.
• Regiones apartadas de los campos agrícolas.
• Zonas rurales que no utilicen agroquímicos y el manejo de la nutrición se base en el uso de materia orgánica.

El hongo Trichoderma lo podemos encontrar abundantemente y podemos recoger muestras del mantillo de bosque nativo, corteza vegetal y madera en descomposición.

Lo identificamos por su tonalidad verde esmeralda y un olor agradable (anisado). Para aislar el hongo del componente donde se encuentra, nos ayudaremos de una cuchilla o navaja bien afilada y desinfectada.

La captura de Trichoderma la realizaremos en bolsas de polipropileno (bolsas de plástico que utilizamos para congelar alimentos), cerrándose para evitar su desecamiento. También podemos usar tarros de cristal.

Nota: A medida que tenemos más conocimiento de hongos y bacterias que existen en los ecosistemas, la identificación y el aislamiento será mucho más selectiva y fácil de realizar.

Esperamos que ya tengáis bastantes Trichodermas para empezar la reproducción. Una medida orientativa es capturar entre 30 y 50 gr.

Cómo Reproducir El Hongo Trichoderma.

Los métodos de reproducción o el cultivo de Trichoderma lo podemos realizar según las herramientas y utensilios que dispongamos. Así, os vamos a describir dos maneras; una más orientada a laboratorio y otra un método casero.

Las dos son similares y funcionan por igual para el objetivo que tenemos entremanos.

Reproducir Trichoderma en laboratorio.

Procederemos tomando submuestras de 20 a 30 gramos que se distribuyen en placas en cámara húmeda por un periodo de 7 a 10 días, con observaciones diarias hasta la aparición de colonias de hongos con crecimientos similares a los de Trichoderma.

Para la identificación del género se recomienda utilizar las características culturales y morfológicas de Trichoderma, creciendo en agar extracto de malta (AM) al 2% (20 g extracto de malta, 20 g agar, 1000 ml de agua destilada estéril), según recomiendan diversos actores.

Las características evaluadas serán el aspecto, borde, color y velocidad de crecimiento de las colonias, forma y disposición de las fiálosporas y fiálides.

Estas características permitirán identificar el género. Para identificar la especie, se precisa de un taxónomo.

Es conveniente solicitar este servicio una vez que se hayan seleccionado los aislamientos más promisorios.

Reproducción de Trichoderma de forma casera.

Ya tenemos las muestras capturadas y vamos a reproducir el Trichoderma por medio de las famosas trampas de arroz. Elaboramos trampas de arroz para trichoderma.

Preparamos cuantas trampas de arroz necesitemos (no olvidéis que el arroz tiene que estar cocido). Las inoculamos con las muestras obtenidas. Con la punta de un cuchillo polvorear las trampas y cubrimos con una gasa o algodón desinfectado.

Una vez inoculadas todas las trampas con el hongo, dejamos reposar en un lugar semi oscuro. De 5 a 7 días observamos si se reproduce, para ver si hemos hecho todo correctamente.

Nota: Puede que nos encontremos con otros colores dentro de las trampas de arroz. Si lo dejamos por más tiempo, el Trichoderma se adueñará de toda la trampa. Si por el contrario estamos inquietos procederemos a la extracción de la zona afectada.

Aplicación Del Trichoderma Para Uso Agrícola.

Antes de poder aplicar el hongo Trichoderma a nuestro terreno, tenemos que activarlo de la siguiente forma:

• En un bidón de unos 100 litros de agua, preferentemente de lluvia, osmotizada o limpia, incorporar el Trichoderma.
• Agregar un litro de leche, un litro de melaza (caña de azúcar) y un kilogramo de harina de trigo o maíz al biopreparado.
• Oxigenar el producto por medio de una bomba de aire durante 48h.

La aplicación se puede realizar mediante riego o pulverizar el producto en la base de la planta. Se repite el proceso una vez a la semana.

Nota: Aplicar en horas tempranas o entre la puesta o salida del sol, así tendremos más posibilidades de que el Trichoderma se establezca en el terreno y realice su trabajo.

Experiencia: Nos preguntan mucho qué cantidad de trichoderma utilizaremos para su activación en un tanque de cien litros. Una medida orientativa sería entre 250 y 300 gramos de trichoderma con arroz.